一、ABO正反定型不符的问题分析
（一）ABO定型问题经常发生的情况为：
1. 明显缺失应该出现的抗-A或抗-B：
(1)新生儿血样
(2)免疫缺陷、免疫紊乱
(3)前带现象
(4)血型型物质过多
(5)抗原太弱，常规方法检查不出来，相应血清中无抗体
(6)亚型，反应是混合视野
2. 由于试剂被污染，或试剂中有额外抗体
3. 明显多出抗原(或多出抗体)
(1)亚型，如A2型可能血清中有抗-A1
(2)自家凝集
(3)获得性B
（二）引起ABO正反定型不一致的原因分析
1. 技术因素：
(1)试剂贮存不当
(2)使用技术错误
(3)使用错误的试剂
(4)使用污染或失效的试剂
(5)离心速度不当
2. 存在IgM性质的自家冷抗体
由于自家冷抗体(冷凝集病,CHD)而导致自家溶血的病人，在低于37℃时血细胞自发凝集，影响正反定型。可用DTT或2-ME来处理细胞及血清来解除此种IgM抗体引起的干扰。血清的反定型可在37℃进行，用O型红细胞作为对照。
3. 抗原表达弱或缺失：
(1)A、B抗原的表达可在下述情况下被抑制：
a.白血病
b.双胞胎
c.H基因变异
(2)A、B抗原表达太弱：由于A、B抗原表达太弱，与抗-A或抗-B不反应，但确实存在A或B抗原，因此血清中无相应的抗体。
4. 高水平可溶性血型物质的病人：
极少数有卵巢囊肿的妇女，由于含高浓度的可溶性血型物质，使抗原减弱或消失，此血型物质分泌进入血液可以中和抗-A或抗-B。当使用未洗涤的RBC用于ABO定型时，型物质就会中和抗-A或抗-B，引起假阴性反应。
5. 混合视野：
(1)来自近期输注非ABO同型红细胞病人的血样
(2)骨髓移植后不久
(3)Tn或A3型红细胞
6. 缺失或弱抗-A、抗-B
(1)新生儿血清
(2)免疫缺陷、紊乱病人
(3)老年人
7. 前带现象
当抗-A或抗-B的效价（如）IgG太高时,立即离心法与A或B细胞不反应。解决方法：
(1)EDTA抗凝血浆结合钙
(2)使用EDTA保存液悬浮细胞
(3)将血浆于56℃灭活补体
(4)血浆或血清用盐水1:10稀释
8. 多凝集：多凝集红细胞，具有不正常的膜结构，可被正常成人血清凝集。起因是微生物酶引起膜的改变，以及膜上糖基合成不完善。
9. 不正常血清蛋白：
白蛋白/球蛋白比例失调的血清引起红细胞产生缗钱状假凝集。
10.血样血清中存在抗试剂成分的抗体：如抗防腐剂的抗体、抗EDTA的抗体等，此种抗体可以通过将红细胞洗涤而解除。
二、解决ABO定型不一致的指导原则
（一）出现弱反应或缺失抗原的解决方案
出现弱/缺失抗原的可能情况
1. A亚型、B亚型或AB亚型
2. 疾病状态：如白血病导致A或B抗原减弱，何杰金病（Hodgkin’s）有时会抑制抗原表达，与白血病类似。
3. 过量的血型物质：由于某种疾病（如腹腔癌、胰腺癌、卵巢囊肿）导致血浆中存在大量的型物质，中和抗－A或抗－B抗体，引起正定型为假阴性或弱阳性。通过洗涤红细胞可解决此问题。
4. 获得性B
5. 抗－A或抗－B试剂中存在低频抗原的抗体
出现弱/缺失抗原的解决措施
1. 洗涤RBC且延长孵育时间进行试验，如果使用洗涤红细胞后反应加强，则考虑是型物质的抑制
2. 酶处理红细胞再次试验
3. 吸收放散确定是否是亚型。
4. 了解输血史(尤其是O型红细胞输注)来分析混合视野
5. 了解病情诊断（尤其是白血病）
6. 了解是否是骨髓移植受者
7. 了解是否是双胞胎
8. 是否使用从前未使用过的单克隆抗体血清进行了血型鉴定
9. 分泌型型物质检查
10.进行玫瑰花试验来确定是否混入其它红细胞，或进行细胞分离
11.如果是弱A或弱B遗传，则检查红细胞上H抗原的表达
患者的正定型与正常反应强度相比属于减弱的反应。从反定型中可以看出，患者血清中不存在ABO系统以外的抗体干扰，也不存在自身抗体的干扰，因和B细胞产生反应，表明红细胞上可能具有A抗原。在正定型中与国产的单克隆抗-A无反应活性，而和抗-AB有弱反应，暗示A亚型的可能。
通过吸收放散、型物质检查确认A亚型。可能是A3。
（二）出现弱反应或缺失抗体的解决措施
出现弱反应或缺失抗体由四种情况引起
1. 年龄：新生儿及老人。
2. 低球蛋白血症：如白血病人、使用免疫抑止药物、低球蛋白的淋巴瘤病人（恶性）、骨髓移植后病人。
3. 丙球缺乏血症：如免疫缺陷病人
4. 双胞胎嵌合体
解决方案
1. 延长反应时间
2. 于室温及4℃检查血清中的抗体。用A、B、O及自身红细胞进行检查
3. 于室温及4℃检查血清中抗体。用酶处理的A、B、O及自身细胞进行检查。可能需要在试验前进行冷抗体的自身吸收
4. 确定病人年龄及临床诊断（如新生儿、免疫病）
5. 确定输血史（非ABO同型的血浆输注）
补充试验：正反定型分别在室温及4度孵育30分钟
可能血型为O型，但具有低效价的抗-A
（三）出现多余抗原（额外抗原）的解决方案
出现多余抗原的可能情况
1. 抗原发生改变：
（1）获得性B：肠道疾病患者，细菌作用导致
（2）多凝集现象：红细胞被掘大多数人的正常血清凝集
2. 红细胞已经被抗体包被：如自家免疫溶血性贫血、输血反应及HDN。
3. 非抗－A及抗－B的抗体与相应抗原形成复合体吸附在红细胞表面，引起正定型非特异性凝集。（洗涤红细胞）如抗血清添加剂：染料的抗体与抗体结合附着在红细胞表面导致。
4. 混合视野：非同型输注，如O型红细胞给其他型输用，非ABO同型的骨髓移植，A3亚型等。
5. 低频率抗原抗体反应：定型血清中的存在低频抗原的抗体，与对应的低频抗原产生阳性反应。
解决措施
1. 将红细胞洗涤再进行试验，确定是否是病人或献血员的血清中存在针对ABO定型试剂成分的抗体
2. 用O型及自家红细胞于室温检查病人血清，确定血清中是否有冷自家抗体，如果有，则用2ME或DTT处理。
3. 用不同厂家的试剂检查洗涤的红细胞
4. 了解病人的临床诊断
5. 如果怀疑是获得性B，则用酸化的抗-B检查
6. 进行ABH分泌型型物质检查
7. 如果用多克隆抗-A检查结果是混合视野，则用蛋白酶处理RBC试验，考虑是否是多凝集
解决方案:询问病史,尤其是下消化道疾病，用酸化的抗-B(pH6.0)检查
在反定型试验中可以看出，O型红细胞和自身对照皆为阴性，表明反定型试验结果可靠，即为O型。而在正定型试验中均为阳性，可能出现的阳性反应不属于ABO系统的抗原抗体反应。需要了解定型血清是否是人血清来源，并了解被检者的疾病诊断，使用非人血清来源的标准定型血清来进行正定型。可能血型为O型的多凝集现象。
可能血型Ｏ,由于抗-B染料丫啶*和标清中的相应抗体形成复合物附着在红细胞表面，造成正定型中出现和红细胞产生3+的非特异性阳性反应。
（四）出现额外抗体：
产生未知的抗体反应的可能情况
1. 蛋白或血浆不正常引起的缗钱状凝集：
血清蛋白浓度异常，球蛋白浓度由于疾病而升高（多发性骨髓瘤），原发性居球蛋白血症，纤维蛋白原浓度升高，血浆扩容剂的使用以及何杰金氏淋巴瘤，新生儿脐血中的华通氏胶。
2. 冷反应性自身抗体：
存在ABO系统的意外抗体：如A2或A2B个体血清中可能存在天然抗－A1，顺式AB人群中弱的抗-B,导致反定型试验多出抗体。
3. 被检者血清中存在ABO系统以外的特异性冷同种抗体，反定型时出现假阳性反应。（谱细胞鉴定抗体特异性）：如抗-M、抗-N等.
解决方案
1. 于室温及4℃检查，确定是否存在自身抗体或冷同种抗体
2. 洗涤红细胞再次进行试验，防止血清中有针对试剂红细胞保存液成分的抗体
在37℃定型，去除冷自生抗体干扰后定型，型物质检测
解决方案:使用抗-A1血清进行正定型鉴定
（2）或O型有ABO以外不规则抗体
解决方案:（1）在正定型中添加抗-H检查
（2）不规则抗体鉴定
（五）混合视野凝集的解决方案
1. 确定是否近期怀孕或输血
2. 确定临床诊断（尤其是白血病）
3. 是否是骨髓移植受者
4. 是否是双胞胎
5. 用细胞分离术将两群细胞分开，分别定型
6. ABH型物质检查
7. 了解输血史
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